재조합 DNA: 정의와 과정

의 기술 재조합 DNA (DNAr)는 유전 공학을 사용하는 기술이며 생성하는 것으로 구성됩니다. 시험관 내 다른 종의 유전 물질이 결합된 인공 DNA 분자. 이러한 이유로 이렇게 얻은 분자를 키메라 DNA 또는 키메라라고 합니다.

이 기술은 생명 공학 및 유전 공학의 기초를 형성하며 농업에서 생물 의학에 이르기까지 다양한 응용 분야를 가지고 있습니다. 예를 들어, 특정 유전자의 발현을 연구하여 종을 얻을 수 있습니다. 특정 해충에 대한 저항성을 보이거나 공급원으로부터 인간 인슐린을 얻는 식물 동물.

TEACHER의 이 수업에서 우리는 당신에게 보여줄 것입니다 재조합 DNA의 정의, 용도 및 과정 개최됩니다. 우리는 당신이이 유전 기술을 더 잘 알 수 있도록 모든 단계를 분석 할 것입니다. 시작했습니다!

재조합 DNA 기술은 다음으로 구성됩니다. 선택된 유전자를 벡터에 도입하는 것. 벡터는 다음의 작은 시퀀스입니다. DNA 와 같이 쉽게 분리할 수 있습니다. 플라스미드 (박테리아 및 기타 원핵생물의 전형적인 원형 및 염색체외 DNA).

관심 유전자를 운반하는 벡터는 숙주 세포에 도입되어 다음을 수행할 수 있습니다. 뒤로 젖히다세포 DNA와 독립적입니다.

재조합 DNA는 무엇을 위한 것입니까?

숙주 세포의 기구를 사용하여, 벡터에 의해 도입된 유전자가 발현되어 상기 유전자에 의해 코딩되는 단백질의 합성을 유도할 것이다. 더욱이, 운반체 세포가 복제할 때, 생성된 세포는 또한 상기 유전자를 포함할 것이고, 따라서 생성되는 새로운 유전자 변형 세포주.

rDNA를 얻는 단계는 다음과 같습니다.

1- 관심 유전자의 분리 및 정제

이 첫 번째 단계에서 목적은 재조합할 유전자(예: 인간 인슐린 또는 성장인자 유전자 등)를 분리하는 것입니다.

• 세포 DNA 얻기: 이를 위해서는 DNA가 세포에서 DNA를 방출해야 하며, 이는 세포 용해에 의해 파괴되어야 합니다. 세포가 파괴되면 단백질이나 RNA와 같은 다른 분자와 함께 유전 물질(DNA)을 방출하므로 세포 DNA를 분리하고 정제해야 합니다.
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• 분리된 유전자 획득: 세포 DNA가 정제되고 농축되면 제한 효소(특정 지점에서 DNA 서열을 깰 수 있는 매우 특정한 효소)를 사용하여 DNA를 절단해야 합니다. 적절한 제한 효소의 작용은 원심분리 또는 크로마토그래피 기술에 의해 분리될 수 있는 유전자를 유리시킵니다.

2- 재조합 DNA의 형성

벡터는 유전물질이다. 분리된 유전자를 통합하여 운반 숙주 세포 내부.
벡터는 일반적으로 다음 특성을 충족해야 하는 플라스미드(원핵생물의 전형적인 원형 DNA), 바이러스 또는 인공적으로 생성된 염색체입니다.

• 분리하기 쉽고 크기가 작아야 합니다.
• 원하는 유전자를 도입하는 요인에 의해 인식되는 서열을 포함해야 합니다.
• 세포 DNA와 독립적으로 숙주 세포 내부에 복제하기 위해 숙주 세포에 들어갈 수 있어야 합니다.
• 그것은 항생제 내성 유전자와 같이 쉽게 식별되고 분리될 수 있는 유전적 마커를 포함해야 합니다.

그만큼 단계 재조합 DNA 과정의 두 번째 단계에는 두 가지가 있습니다.

1. 벡터 자르기: 삽입할 유전자를 얻는 데 사용된 것과 동일한 제한 효소를 사용하여 벡터 DNA에서 절단이 이루어지고 DNA의 두 끝이 자유로워집니다.
2. 유전자 삽입: 제한효소의 작용으로 인한 자유단은 유전자 분리 및 정제의 첫 번째 단계에서 이전에 분리된 유전자가 삽입되는 지점입니다. 벡터와 유전자 사이의 결합(벡터에 한 번 도입되면 삽입물이라고 함)은 작용에 의해 발생합니다. 벡터와 삽입체 사이의 공유 결합을 촉매하여 분자를 생성하는 효소 리가아제의 재조합 DNA.

3- 숙주 세포에 rDNA 도입

이 단계는 다음으로 수행할 수 있습니다. 다른 기술 예를 들어 물리화학적 변화는 rDNA의 통과를 허용하는 숙주 세포막의 투과성, rDNA의 미세주입을 의미합니다. 마이크로피펫을 사용하여 rDNA를 세포막과 융합할 수 있는 리포솜에 도입하여 내용물을 세포의 세포질로 방출 손님.

숙주 세포는 박테리아 세포, 효모 세포 또는 암세포를 사용하여 매우 빠르게 번식하는 세포여야 합니다.

4- 숙주 세포의 배양

일단 rDNA가 숙주 세포에 도입되면, 분열을 유도하여 재배한다. rDNA를 포함하는 많은 수의 세포를 얻기 위해. 세포는 식민지의 분리를 허용하는 페트리 접시에서 성장합니다. 이후에 액체 배지에서 배양되어 많은 수의 클론(유전적으로 동일한 세포 ).

5- 재조합 DNA를 포함하는 세포의 검출 및 선택

이 마지막 단계에서는 대략 rDNA로 세포를 식별합니다. 이러한 세포를 식별하기 위해 마커를 사용하여 rDNA의 존재를 감지합니다. 이들 유전적 마커는 다양할 수 있으며, 예를 들면 항생 물질. 배양물에 존재하는 항생제 내성 유전자가 이전에 rDNA에 통합된 경우.